دستور العمل انجام رنگ آمیزی رایت – گیمسا
هدف :
شمارش افتراقی و بررسی مرفولوژی گلبولهای سفید ، قرمز و پلاکت.
موارد کاربرد :
ارزیابی و تشخیص انواع کم خونی و روند درمان آنها.
بررسی انواع ناهنجاریهای پلاکتی گلبولهای سفید
و لوسمی ها و روند درمان آنها.
نکات ایمنی :
از آنجا که آزمایش برروی نمونه های انسانی انجام
میشود باید کلیه آنها را بالقوه آلوده فرض نمود.
رنگ رایت – گیمسا و متانول مورد استفاده سمی و آتش زا
می باشند . در حین استفاده از آنها به موارد ایمنی توجه کنید.
تجهیزات و مواد مورد نیاز قبل از انجام کار:
رنگ رایت – گیمسا
آب معمولی
سینی و جا لامی مخصوص رنگ آمیزی
مراحل انجام رنگ آمیزی رایت – گیمسا :
رنگ رایت – گیمسا جزء رنگهای گروه رومانوفسکی
بوده و به صورت محلول آماده تهیه می گردد.
بایدتوجه کرد که برای نتیجه بهتر در رنگ آمیزی
باید مقدار رنگ مورد استفاده برای هر روز را
در همان روز از کاغذ صافی رد کرده تا
رسوب اضافی آن گرفته شود.
مراحل انجام رنگ آمیزی رایت – گیمسا به شرح ذیل می باشد:
۱ – بعد از اینکه اسمیر تهیه شده با متانول
فیکس و بطور کامل خشک گردید، ۱ میلی لیتر از رنگ
را روی لام هایی که بطور افقی در سینی
مخصوص رنگ آمیزی قرار دارند بریزید.
۲ – بعد از گذشت ۱۲ دقیقه به همان مقدار آب معمولی
بر روی آن ریخته و با فوت کردن آنها را باهم مخلوط کنید .
۳ – بعد از گذشت ۱۲ دقیقه لامها را با آب معمولی
شسته ورسوبات پشت لام را با گاز تمیز کنید.
۴ – لامها را بصورت عمودی در جا لامی قرار
داده تا خشک شوند و سپس آنها را بررسی کنید.
ویژگیهای گسترشی که با رنگ رایت-گیمسا به خوبی رنگ آمیزی شده:
گسترشی که با رنگ رایت-گیمسا به خوبی
رنگ امیزی شده باشد در هنگام بررسی با
چشم غیر مسلح به رنگ صورتی خواهد بود.
در بزرگنمایی کم میکروسکوپ ، سلولها
باید یکنواخت توزیع شده باشند.گلبولهای قرمز
به رنگ صورتی هستند ، نه به رنگ لیمویی
یا قرمز . رسوب رنگ در گسترش باید در
کمترین حد باشد. رنگ گسترش می بایست
یکنواخت باشد. سلولهای خون باید عاری
از هرگونه ارتیفکت نظیر واکوئل باشند. هسته
لکوسیتها به رنگ اغوانی و کروماتین و پاراکروماتین
آن به وضوح از هم جدا می باشند و گرانولهای
نوتروفیلیک سیتوپلاسمی ، رنگ قهوه ای مایل به زرد(برنزه)